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RNA 可编程 DNA 核酸内切酶 Cas9 广泛用于需要高度特异性的基因组工程。虽然这是一种受规范碱基配对很好控制的机制，但有证据表明 Cas9 在某些情况下确实接受错配。
这可能被视为对基因组工程所需精度的威胁，至少在最终需要如此高精度并且需要避免接受错配的环境中，例如：细胞基因治疗。
来自RCPRC病原体科学研究所 Emmanuelle Charpentier 实验室的科学家详细阐述了与结合和切割相关的 Cas9 特性。他们证明了 Cas9 桥螺旋中的精氨酸严重影响引导 RNA，并靶向 DNA 结合和切割。这些精氨酸聚集成两组，可增加或降低 Cas9 对错配的敏感性。
为了提高 Cas9 对错配的敏感性，从而使 Cas9 及其引导 RNA 对预期的目标序列更具特异性，他们鉴定了一个双突变体Cas9_R63A/Q768A, 在大多数情况下，与人类细胞中的野生型蛋白质相比，它显示出更高的特异性。这种精确度的提高确实没有或只有轻微但仍然可以容忍的目标依赖方式的活动减少。
因此，在关键的人类基因组编辑方法中使用这种变异而不是野生型可能是有益的，例如：在体外人类原代细胞培养中进行基因组编辑，只要精度被认为是最重要的。
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